揭秘“手撕病毒”的P3实验室

科技日报记者 龙跃梅 通讯员 陈淑华

“这里是与病毒‘零距离’接触的地方，整个实验室完全密封，室内处于负压状态，我们喜欢用‘三流’来形容它，即人流、物流、气流的单向流动，确保在里面的污染物不会泄漏到外面而造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国说，而“这里”指的就是P3实验室。广东省第二人民医院每天400多份新冠肺炎核酸检测就是在这里开展的。

现在，我们一起来揭开省二医P3实验室的神秘面纱，看看病毒究竟在P3实验室是怎样被“揪出来”的？

揭秘一：前世今生 

P3实验室是生物安全防护三级实验室，P是Protection的缩写。整个实验室完全密封，室内处于负压状态，从而使实验室内部的气体不会泄漏到外面而造成污染，也就是“气流”的单项流动。实验室生物安全防护实验室是指实验室的结构和设施、安全操作规程、安全设备能够确保工作人员在处理含有致病微生物及其毒素时，不受实验对象侵染，周围环境不受污染。

根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为四级，一级最低，四级最高。广东省第二人民医院新冠病毒核酸检测就是在P3实验室进行的。

揭秘二：抽丝剥茧 

核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，而检测流程中的每一个环节都是精细活，容不得半点马虎。在操作中，实验员面对眼前的样本，需要“一个一个地揭开盖子，开盖加样和核酸提取”，这无疑是与“病毒”正面交锋，现在来看省二医的实验员是如何一一过招。

实验室内的检测流程可分为5个步骤：样本进入“传递窗”——灭活处理——开盖加样和核心提取——扩增反应判断结果——高压灭菌。

第一步，样本进入实验室也有讲究——“传递窗”隔离空气。

“传递窗”也叫Air Lork（空气锁）

采集的检测样本如咽拭子或肛拭子，在进入P3实验室前就得先进入一个特殊的窗口——“传递窗”，这个窗口也叫Air Lork，空气锁。顾名思义，与空气有关，这个传递窗有不能同时打开的双重门，保证传递样本时带进去的空气被隔离在双重门中，保证实验室外的环境不受污染。这也是“三流”中“物流”，样本的命运起点，在这里开启它在实验室中短暂的一生。

第二步，检测前的灭活处理——不一定但相对的安全。

标本处理间，在这里进行开盖加样和核酸提取

样本在水浴箱经半个小时56℃高温灭活，这样会使病毒蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力，在对样本进行检测时相对安全，但是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。

第三步，检测的核心环节——进行开盖加样和核酸提取。

通过核酸扩增仪进行扩增反应

第四步，扩增反应——45个循环绘制荧光曲线判断结果。

根据曲线和参数分析判断结果

提取的核酸送到核酸检测室内，就要上仪器了。提取的核酸加入扩增试剂中，通过荧光PCR仪进行RT-PCR反应，先将提取的核酸逆转录成DNA，再以DNA为模版，对特定位点进行扩增，利用不同的温度进行变性、退火和延伸，每个循环采集荧光值，45个循环后绘制荧光曲线，用时约110分钟，实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。

第五步，污染物的高压灭菌处理。

实验过程产生的污物通过高压灭菌后，按相关普通医疗垃圾处理。“物流”的终点在这里就结束了。

产生的污物通过高压灭菌后，按相关医疗垃圾处理

揭秘三：倾柯卫足 

“三流”中的“人流”又是什么？来看看工作人员是如何工作的。

首先在清洁区内穿戴中级防护服——通过缓冲间进入到实验室内负压工作间，在这里进行标本处理，核酸提取及检测——完毕后进行空间、表面消毒，按顺序脱下防护服——通过淋浴间更衣后，回到清洁区。这些步骤一个都不能少！

通过缓冲间进入到实验室内